UNASSIGNED: To evaluate a newly developed microscale quantitative suspension test compared to the existing standard suspension test using determination of the bactericidal and yeasticidal activity of
glutaral as one step to improve the sustainability of disinfectant testing.
UNASSIGNED: The testing principles of the quantitative suspension test according to VAH method 9 (comparable to EN 13727) was used as a standard suspension test using 8.0 mL product test solution, 1.0 mL organic load and 1.0 mL test suspension. In addition, a micro-scale suspension test was performed in 96-well plates with 160 µL product test solution, 20 µL organic load and 20 µL test suspension. S. aureus ATCC 6538, P. aeruginosa ATCC 15442 and C. albicans ATCC 10231 were test organisms.
Glutaral was tested at concentrations of 0.05%, 0.1%, 0.2% and 0.3% with exposure times of 1, 5 and 15 min. Polysorbate 80 (30 g/L), lecithin (9 g/L), L-histidine (1 g/L) and glycine (10 g/L) were used as validated neutralizers. After serial dilution of the disinfectant-neutralizer-mixture, plates were incubated for 48 h at 36°C (bacteria) or 72 hours at 30°C (C. albicans) and colony forming units (cfu) counted. The lg reduction was calculated as the difference between the results of the water control and the disinfectant at the end of the exposure time. All experiments were done in triplicate under clean conditions. Means of lg reduction were compared with the unpaired t-test, p<0.05 was considered to be significant.
UNASSIGNED: Sufficient bactericidal activity according the VAH test requirements of at least 5 lg was found with both methods in 16 data sets of 24 data sets in total, and insufficient bactericidal activity of less than 5 lg was found with both methods in 7 data sets. In one data set, the mean lg reduction was above 5 lg with the microscale method and <5 lg with the VAH method, with no significant difference between the data sets (p=0.3096; 0.2%
glutaral, 1 min, P. aeruginosa). A sufficient yeasticidal activity of at least 4 lg was found with both methods in one data set, an insufficient yeasticidal activity of less than 4 lg was found with both methods in 8 data sets. With one exception, no significant differences were detected between the two methods below the efficacy threshold.
UNASSIGNED: The microscale quantitative suspension test proved to provide results similar to those of VAH method 9 when the bactericidal and yeasticidal activity of glutaralwas evaluated, with 32 out of 33 evaluations yielding consistent results in terms of efficacy. Its suitability should be confirmed with additional bacterial species, additional biocidal active substances and in other laboratories.
UNASSIGNED: Evaluierung eines neu entwickelten Mikro-Suspensionstests im Vergleich zur bisherigen Standardmethode am Beispiel der Bestimmung der bakteriziden und levuroziden Wirkung von
Glutaral als ein Schritt auf dem Weg zu mehr Nachhaltigkeit in der Desinfektionsmittel-Testung.
UNASSIGNED: Die VAH-Methode 9 wurde als Standard-Suspensionstest mit 8,0 mL Produkttestlösung, 1,0 mL organischer Belastung und 1,0 mL Testsuspension verwendet. Darüber hinaus wurde ein Mikroskala-Suspensionstest (Mikromethode) in 96-Well-Platten mit 160 µL Produkttestlösung, 20 µL organischer Belastung und 20 µL Testsuspension durchgeführt. Als Testorganismen dienten S. aureus ATCC 6538, P. aeruginosa ATCC 15442 und C. albicans ATCC 10231.
Glutaral wurde in Konzentrationen von 0,05%, 0,1%, 0,2% und 0,3% mit Expositionszeiten von 1, 5 und 15 min getestet. Polysorbat 80 (30 g/L), Lecithin (9 g/L), L-Histidin (1 g/L) und Glycin (10 g/L) wurden als validierte Neutralisationssubstanzen verwendet. Nach serieller Verdünnung des Desinfektionsmittel-Neutralisator-Gemischs wurden die Platten 48 h bei 36°C (Bakterien) bzw. 72 h bei 30°C (C. albicans) bebrütet und die Kolonie bildenden Einheiten (KbE) gezählt. Die lg-Reduktion wurde als Differenz zwischen den Ergebnissen der Wasserkontrolle und des Desinfektionsmittels am Ende der Expositionszeit berechnet. Alle Experimente wurden in dreifacher Ausführung bei geringer Belastung durchgeführt. Die Mittelwerte der lg-Reduktion wurden mit dem ungepaarten t-Test verglichen, wobei ein p-Wert <0,05 als signifikant angesehen wurde.
UNASSIGNED: Eine ausreichende bakterizide Wirkung von mindestens 5 lg wurde mit beiden Methoden in 16 Datensätzen von insgesamt 24 Datensätzen (je als Mittelwert der Dreifachbestimmung) gefunden, eine unzureichende bakterizide Wirkung von <5 lg wurde mit beiden Methoden in 7 Datensätzen gefunden. In einem Datensatz lag die mittlere lg-Reduktion mit der Mikromethode über 5 lg und mit der VAH-Methode unter 5 lg, wobei kein signifikanter Unterschied bestand (p=0,3096; 0,2% Glutaral, 1 min, P. aeruginosa). Eine ausreichende levurozide Wirkung von mindestens 4 lg wurde mit beiden Methoden in einem Datensatz gefunden, eine unzureichende levurozide Wirkung von weniger als 4 lg wurde mit beiden Methoden in 8 Datensätzen gefunden. Unterhalb der Wirksamkeitsgrenze konnten mit einer Ausnahme keine signifikanten Unterschiede der beiden Methoden festgestellt werden.
UNASSIGNED: Die Mikromethode des quantitativen Suspensionsversuchs lieferte in 32 von 33 Versuchsansätzen identische Ergebnisse wie die VAH-Methode 9, wenn die bakterizide und levurozide Wirkung von Glutaral im Hinblick auf das Erreichen- oder Nichterreichen der Wirksamkeitsgrenze bewertet wird. Die Eignung der Methode sollte mit zusätzlichen Bakterienspezies, weiteren bioziden Wirkstoffen und in zusätzlichen Labors bestätigt werden.