背景:属于支原体属的细菌体积较小,没有细胞壁和小基因组。它们通常在其动物宿主中引起呼吸系统疾病。在全世界的马的呼吸道中发现了三种,即支原体(M.)equirhinis,M.Pulmonis和M.Felis,但它们在临床病例中的作用尚不清楚。
目的:本研究的目的是i)开发和验证检测工具,分离和鉴定不同的支原体属。临床马呼吸道标本中的菌株和ii)随后根据样本类型和马特征(年龄,品种,性)。
方法:验证支原体诊断和随后的患病率研究的工作流程。
方法:用无支原体的气管冲洗样品掺加了已计数的菌株和DNA稀释液来验证培养方法和实时PCR(rt-PCR)测定。通过16SrRNA基因测序鉴定分离的菌株。对616匹患有呼吸系统疾病的马进行了患病率测定,2020年在法国采样。
结果:总计,发现104匹马(16.9%)对支原体属呈阳性。至少有一种方法。M.equirhinis是主要的循环物种,占rt-PCR阳性样品的85%和40株培养菌株的98%。
结论:提出的富集前程序提高了检测的灵敏度,但阻碍了临床标本中初始支原体载量的定量。
结论:支原体的患病率随年龄而变化,品种,和样品类型。本文受版权保护。保留所有权利。
BACKGROUND: Bacteria belonging to the genus Mycoplasma are small-sized, have no cell walls and small genomes. They commonly cause respiratory disorders in their animal hosts. Three species have been found in the respiratory tract of horses worldwide, that is., Mycoplasma (M.) equirhinis, M. pulmonis and M. felis, but their role in clinical cases remains unclear.
OBJECTIVE: The aim of this study was to i) develop and validate tools to detect, isolate and identify different Mycoplasma spp. strains in clinical equine respiratory-tract specimens and ii) subsequently define the prevalence of the three species in France depending on sample types and horse characteristics (age, breed, sex).
METHODS: Validation of a workflow for mycoplasma diagnosis and subsequent prevalence study.
METHODS: Mycoplasma-free tracheal wash samples spiked with numerated strains and DNA dilutions were used to validate the culture methods and real-time PCR (rt-PCR) assay. Isolated strains were identified by 16S rRNA gene sequencing. Prevalences were determined on a population of 616 horses with respiratory disorders, sampled in France in 2020.
RESULTS: In total, 104 horses (16.9%) were found to be positive for Mycoplasma spp. by at least one method. M. equirhinis was the predominant circulating species, accounting for 85% of the rt-PCR-positive samples and 98% of the 40 cultured strains.
CONCLUSIONS: The proposed pre-enrichment procedure improves the sensitivity of detection but hinders the quantification of the initial mycoplasma load in the clinical specimens.
CONCLUSIONS: Prevalence of mycoplasma varied with age, breed, and type of sample.
UNASSIGNED: Bakterien, die zur Gattung Mycoplasma gehören, sind klein, haben keine Zellwände und ein kleines Genom. Sie verursachen bei ihren tierischen Wirten häufig Erkrankungen der Atemwege. Drei Spezies wurden weltweit in den Atemwegen von Pferden gefunden, nämlich Mycoplasma (M.) equirhinis, M. pulmonis und M. felis, aber ihre Rolle in klinischen Fällen bleibt unklar.
UNASSIGNED: Ziel dieser Studie war es, i) Instrumente zum Nachweis, zur Isolierung und zur Identifizierung verschiedener Mycoplasma spp. in klinischen Atemwegsproben von Pferden zu entwickeln und zu validieren und ii) anschließend die Prävalenz der drei Spezies in Frankreich in Abhängigkeit von Probentypen und Pferdemerkmalen (Alter, Rasse, Geschlecht) zu bestimmen.
METHODS: Validierung eines Arbeitsablaufs für die Mykoplasmen-Diagnose und anschließende Prävalenzstudie.
METHODS: Mykoplasmenfreie Trachealspülungen, die mit nummerierten Stämmen und DNA-Verdünnungen versetzt waren, wurden zur Validierung der Kulturmethoden und des real-time PCR-Tests (rt-PCR) verwendet. Isolierte Stämme wurden durch Sequenzierung des 16S rRNA-Gens identifiziert. Die Prävalenzen wurden in einer Population von 616 Pferden mit Atemwegserkrankungen bestimmt, die 2020 in Frankreich beprobt wurden.
UNASSIGNED: Insgesamt wurden 104 Pferde (16.9%) mit mindestens einer Methode positiv auf Mycoplasma spp. getestet. M. equirhinis war die vorherrschende zirkulierende Spezies und machte 85% der rt-PCR-positiven Proben und 98% der 40 kultivierten Stämme aus.
UNASSIGNED: Das vorgeschlagene Voranreicherungsverfahren verbessert die Nachweisempfindlichkeit, erschwert aber die Quantifizierung der ursprünglichen Mykoplasmenbelastung in den klinischen Proben.
UNASSIGNED: Die Prävalenz von Mykoplasmen variierte je nach Alter, Status des Rennpferdes und Art der Probe.