关键词: Plasmodium arthropod gene editing hematophagy vascular biology

Mesh : Animals Aedes / parasitology genetics metabolism Salivary Proteins and Peptides / metabolism genetics Insect Proteins / genetics metabolism Mosquito Vectors / parasitology genetics Feeding Behavior Plasmodium gallinaceum / genetics metabolism Saliva Female

来  源:   DOI:10.1128/mbio.02289-23   PDF(Pubmed)

Abstract:
OBJECTIVE: During blood feeding, mosquitoes inject saliva into the host skin, preventing hemostasis and inflammatory responses. D7 proteins are among the most abundant components of the saliva of blood-feeding arthropods. Aedes aegypti, the vector of yellow fever and dengue, expresses two D7 long-form salivary proteins: D7L1 and D7L2. These proteins bind and counteract hemostatic agonists such as biogenic amines and leukotrienes. D7L1 and D7L2 knockout mosquitoes showed prolonged probing times and carried significantly less Plasmodium gallinaceum oocysts per midgut than wild-type mosquitoes. We hypothesize that reingested D7s play a vital role in the midgut microenvironment with important consequences for pathogen infection and transmission.
摘要:
蚊子唾液通过防止宿主止血和免疫反应的药理活性化合物促进血粉获取。这里,我们通过CRISPR/Cas9产生了两个敲除(KO)蚊子系,以在功能上表征D7L1和D7L2,这两种来自黄热病蚊子载体埃及伊蚊的大量表达的唾液蛋白。D7s结合并清除参与咬伤部位止血的生物胺和类二十烷酸。通过质谱证实KO蚊子唾液腺中不存在D7蛋白,酶联免疫吸附测定,用特异性抗体对唾液腺进行荧光显微镜检查。D7-KO蚊子的探测时间比亲本野生型更长。当使用抵抗炎性损伤的突变小鼠时,探测时间的差异被消除。这些结果证实了D7蛋白在体内作为白三烯清除剂的作用。我们还研究了D7唾液蛋白在疟原虫感染和传播中的作用。两种KO品系每个中肠的卵囊明显较少。我们假设KO蚊子中肠中不存在D7蛋白可能是造成寄生虫恶劣环境的原因。这项工作产生的信息突出了唾液基因产物在血液喂养和病原体感染中的生物学功能。在血液喂养期间的重要性,蚊子将唾液注入宿主皮肤,预防止血和炎症反应。D7蛋白是采血节肢动物唾液中最丰富的成分之一。埃及伊蚊,黄热病和登革热的媒介,表达两种D7长型唾液蛋白:D7L1和D7L2。这些蛋白质结合并抵消止血激动剂如生物胺和白三烯。与野生型蚊子相比,D7L1和D7L2敲除蚊子的探查时间延长,并且每个中肠携带的疟原虫卵囊明显减少。我们假设摄入的D7s在中肠微环境中起着至关重要的作用,对病原体感染和传播具有重要影响。
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