OBJECTIVE: The model of the sebocyte cell line SZ95 was used to identify methylated CpG islands at the 5\'-end of the FHIT gene and the decrease of gene expression as well as the increase of double-stranded (ds) DNA breaks were examined.
METHODS: Methylation, immunofluorescence analysis, promotor sequencing and treatment of SZ95 cells with 5‑azacytidine/trichostatin A (TSA).
RESULTS: The cultivation was accompanied by an increasing methylation of the CpG islands, a decrease of the FHIT gene expression and an accumulation of ds-DNA breaks. Treatment with 5‑azacytidine/TSA showed a decrease in DNA methylation and a re-expression of FHIT transcripts.
CONCLUSIONS: Epigenetic changes in the cellular genome are caused by in vitro cell culture. Consequently, a positive selection of sebocytes with an epigenetically inactivated FHIT locus occurs.
UNASSIGNED: HINTERGRUND: Fehlt die Tumorsuppressorfunktion des fragilen Histidin-Trias(FHIT)-Genprodukts, so können Talgdrüsenkarzinome entstehen.
UNASSIGNED: Am Modell der Sebozytenlinie SZ95 sollten methylierte CpG-Inseln am 5′-Ende des FHIT-Gens identifiziert, die Abnahme der Genexpression und die Zunahme von DNA-Doppelstrang(ds)-Brüchen untersucht werden.
METHODS: Methylierungs‑, Immunfluoreszenzanalysen, Promotorsequenzierung sowie Behandlung der SZ95-Zellen mit 5‑Azacytidin/Trichostatin A (TSA).
UNASSIGNED: Die Kultivierung der Sebozyten verlief mit einer zunehmenden Methylierung der CpGs, einer Abnahme der FHIT-Genexpression sowie Anhäufung von DNA-ds-Brüchen. Die Behandlung mit 5‑Azacytidin/TSA zeigte eine Abnahme der DNA-Methylierung sowie Re-Expression von FHIT-Transkripten.
CONCLUSIONS: Durch In-vitro-Zellkultur werden epigenetische Veränderungen im zellulären Genom hervorgerufen. Es folgt eine positive Selektion von Sebozyten mit epigenetischer Inaktivierung des FHIT-Genorts.